Nachweis von Riboflavin (Vitamin B₂)

Geräte:

Reagenzgläser, UV Lampe (366 nm)

Chemikalien:

Probe (z.B. Milch und Milcherzeugnisse, Hülsenfrüchte, Gemüse, Vollkornprodukte, Fisch, Muskelfleisch, Eier etc.)

Natriumdithionit (Xn)


dest. Wasser

Hinweis:

Man sollte im Dunkeln arbeiten.

Durchführung:

Man stellt zunächst eine gesättigte Natriumdithionitlösung her. Diese sollte frisch angesetzt werden.
Nun gibt man je einige Milliliter der Probe in zwei Reagenzgläser. In eines davon gibt man tropfenweise Natriumdithionit-Lösung. Nun werden die Reagenzgläser im UV-Licht betrachtet.

Entsorgung:

Der Inhalt der Reagenzgläser kann in den Abfluss gegeben werden.

Erklärung:

In dem Reagenzglas zu dem keine Natriumdithonit-Lösung gegeben wurde ist eine gelb-grüne Fluroeszenz zu erkennen. Im anderen Reagenzglas wurde das Riboflavin reduziert und es ist keine gelb-grüne Fluoreszenz zu sehen. Das Riboflavin wird durch das Natriumdithionit zu Dihydroflavin reduziert. Das Dihydroflavin besitzt keine Fluoreszenz. Eine mögliche blaue Fluoreszenz kann durch Tyrosin verursacht werden. Nach einiger Zeit tritt wieder die grün-gelbe Fluoreszenz ein. Der Luftsauerstoff reoxidiert das Dihydroflavin zurück zu Riboflavin.


Riboflavin


Dihydroflavin

Bilder:


Rechts erfolgte die Zugabe von Natriumdithionit. Links ist die schwache Fluoreszenz von Riboflavin zu erkennen.

Ein interessanter Nachweis mit der Fluoreszenz im UV-Licht!

Ich will das heute noch mit einigen anderen Lebensmitteln ausprobieren. Leider ist die Fluoreszenz wirklich sehr schwach.

Hast du schon in Betracht gezogen, die Probe im Vakuum aufzukonzentrieren?

Ja. Nur da ich keine Vakuumpumpe habe geht das leider nicht. Nochnichtmal meine Wasserstrahlpumpe kann ich benutzen, da mir vor einigen Tagen die Wasserverbindung zum Lab geplatzt ist (besser gesagt im Lab, gab eine schöne überschwemmung).

Funktioniert übrigens auch mit B₁₂

EDIT:


Eine Doppelbindung muss weg und die andere verschoben werden... das ist nur ein diprotoniertes Riboflavin.


[uni-bayreuth.de]

Zur Erklärung:



2,3-Dihydropyrazin 1 "Ausgangsverbindung"
1,2,3,4-Tetrahydropyrazin 2 "Dihydro[Ausgangsverbindung]"
Piperazin 3 "Tetrahydro[Ausgangsverbindung]"