Jetzt relativ kurz vor dem großen Treffen im Oktober hatten wir Mods eine etwas kleinere Runde, insbesondere dadurch klein dass Niko leider nicht kommen konnte.

Im folgenden mal ein paar Eindrücke. Zuerst einige gute Zitate vom Treffen - für besondere Komik mal aus dem Zusammenhang gerissen.

Jan: "Ja, wie sähest denn du nach zwei Atombomben aus?"

Jan (zu Stephan): "Du stellst den Garten für den Atomtest zur Verfügung."
Stephan: "Nicht dass deine Nachbarn wieder schimpfen."

Jan: "Jan + Stephan - Tobi" [Erklärung: Wir haben PCR durchgeführt und die Probengefäße aufgrund ihrer geringen Größe nur mit Zeichen markiert. Auf einem Zettel haben wir dann aufgeschrieben:
* Jan
+ Stephan
- Tobi
Was dann nunmal wie ne Rechnung aussah...]

Tobi: "Wir können es ja mal einschalten und gucken ob was explodiert."

Stephan: "KCN - mach mal 'ne Schnupfprobe!"

Jan: "Hier sind meine abgebrannten Brennstäbe."

Tobi: "Dann muss man eine gutschmeckende Kuh mit einem Bullen paaren, der auch gut geschmeckt hat."

Tobi: "Pimp my Fliegenklatsche."

Zu den Versuchen: DNA-Isolation, DNA-Restriktion, PCR und Gelelektrophorese.


Tobi (l) und Stephan (r) isolieren ihre DNA.


Meine DNA scheidet sich im 2-Propanol ab.


Unsere DNA-Proben im Eisbad, versetzt mit EcoRV-Restriktionsenzym und bovine serum albumin als Cofaktor. Der Kühlakku ist der Wahnsinn und hat die paar Eiswürfel absolut unnötig gemacht. Nach 3-4 h als Kühlmittel im Eisbad war er selbst kaum angetaut.


Erhitzen der Restriktionsansätze auf 36°C für 2 h, gefolgt von thermischer Inaktivierung des EcoRV bei 80°C für 20 min.


Die PCR-Ansätze im Eisbad. Unsere DNA-Proben nach Restriktion, versetzt mit Taq-DNA-Polymerase, Deoxynucleosidtriphosphaten und, zumindest vermutlich, Primer. Letzterer war nicht sichtbar (33 µg), deswegen ist es nichtmal sicher dass er überhaupt (vollständig) in den Ansatz transferiert wurde.


Mangels eines Thermocyclers haben wir 20 PCR-Cyclen von Hand in drei Wasserbädern durchgeführt. Jeder Cyclus dauerte 11 Minuten (30 s Denaturation bei 94°C, 30 s Annealing bei 55°C, 10 min Elongation bei 75°C). Theoretisch wird die DNA in 20 Cyclen etwas mehr als vermillionenfacht.


Unser improvisierter Probenhalter für die PCR


Unser Aufbau für die Gelelektrophorese; Stromversorgung dabei auch improvisierte 130 V DC.


Die Gelelektrophorese. Das mit reichlich Ethidiumbromid angefärbte Gel wurde durch die Elektrophorese entfärbt, denn die Ethidiumkationen fühlten sich der Kathode..."sehr zugeneigt"...und haben das Gel verlassen. Selbst im Tris-Puffer über dem Gel bildete sich eine klare Grenze zwischen hoher und niedriger Ethidiumbromidkonzentration.


Gelelektrophorese unter UV-Licht...


...und der "Cyan'sche Zombie" unter UV-Licht. Das kam hauptsächlich dadurch zustande, dass ich die intensive Fluoreszenz meiner Zähne festhalten wollte und die Kamera verwackelt ist.

*grusel*
soll ich mal das Video mit der "Unkraut-Aktion" bei YouTube hochladen?

Klar, mach mal.

http://www.youtube.com/watch?v=VDs_3wbsi8A

An alle, die wir zum Nachmachen verleiten, denkt immer daran...

wer hat denn das Mn2O7 auf die schönen Gewächse draufgetan xD?
Nettes Mitell,muss schon sagen,aber mit gefallen Kupersalze da doch besser....

@stephan: genau DAS wahlplakat meinte ich

*Thread ausgrab*

Nachdem ich mich so erfolgreich als Archäologe betätigt habe, wollen wir den wieder entdeckten Thread gleich einmal wiederbeleben...

...*Luft hohl*

Jan, unter welchem Namen werden denn die kleinen porösen "Blöcke", in denen die Reaktionsgefäße stecken, verkauft?

Ich habe schon unter allen erdenklichen Namen gegoogelt (Boxah, hör gut zu! ), jedoch nichts gefunden.

LG

Sam

Wir nennen die dinger einfach nur "Schwimmer" kannste dir auch selbst machen. Einfach Moosgummi lochen.

Ne, hier wird schon gekauft - zahlt ja die Schule

Diese "Schwimmer" sollen Verwendung bei der Aufnahme von Reaktionsgefäßen in Dewargefäßen bis -78° C finden, welche Materialien bieten sich dort denn an?

BTW; bin ich der einzige, bei dem VG nicht funktioniert? Mein Browser (Firefox) sagt, es gäbe einen Seitenladefehler, wobei die Internetverbindung wie geschmiert läuft?

Gute Frage. Kommt auf die Kühlmischung an. Außerdem ist die Frage wie stark die Materialien bei der Temperatur verspröden. Normalerweise müssen die nur Temperaturdifferenzen abkönnen wie sie z.B. beim Abkühlen von Bakterien beim Einschleusen von fremd DNA oder Ähnlichem auftreten also ~0°C.

Sebastian bastelt zur Zeit vermutlich etwas rum, deshalb ist VG zur Zeit down.

Trockeneis/Ethanol, wobei meistens wohl Calciumchlorid-Mischungen bis maximal -40° C zum Einsatz kommen werden.

Ich hab die Teile aus der Schule, insofern kann ich dir da leider nicht weiterhelfen. Das schon vorgeschlagene Moosgummi oder Styroporplatten sollten zum Selbermachen ganz gut geeignet sein (zumindest bei Calciumchloridlösung).